Hola, en esta entrada venimos a publicar una pequeña exposición sobre lo ya mencionado en el titulo de la misma:
https://prezi.com/u-bkkxjp-o85/metodos-y-tecnicas-de-limpieza-desinfeccion-y-asepsia/
miércoles, 16 de septiembre de 2015
Encuestas
Nuestro grupo decidió aplicar unas encuestas, variando según el equipo que la aplico, obtuvimos varias respuestas, tanto buenas cómo malas, después de una breve explicación estas fueron las respuestas obtenidas:
¿Conoces las RPBI?
¿Conoces las RPBI?
- La gran mayoría respondió afirmativamente a esta pregunta, en un porcentaje de 7/10
¿Sabes lo que significan las NOM's?
- Por desgracia en esta pregunta, se respondió negativamente a esto, puesto que muy pocos lograban recordar el significado de estas siglas, con un porcentaje de 4/10
¿Quién invento el microscopio?
- Esta pregunta se planteo como las anteriores, siendo preguntas cerradas con dos respuestas a elegir, vimos gran interés al plantear la historia de la microbiologia como campo de estudio, por lo cual hubo un mayor porcentaje de aciertos con un 9/10
¿Conoces los métodos de esterilización y desinfección?
- La gran mayoría al no estar relacionados con esto, por no ser necesario en su especialidad no conocían esto, tras una breve explicación, quedo claro, aunque no del todo, teniendo un porcentaje de 6/10
¿De qué color son los reactivos ácidos?
- Siendo una pregunta bastante fácil obtuvo un 100% de respuestas acertadas
¿Quién fue Antony Van Leeuwonhoek?
- Este, estando relacionada con la tercera pregunta, fue una respuesta bastante fácil, con aciertos de 9/10
¿Qué significa RPBI?
- Está se complico un poco, puesto qué a la hora de relacionar las siglas fue un poco confuso para aquellos que respondieron las preguntas. 6/10
¿Qué invento R.J Petri?
- Esta fue demasiado obvia, teniendo un 100% en todas las encuestas realizadas
¿Qué entiendes por asepsia?
- Un gran porcentaje de ellos respondieron correctamente, algunos confundiendo asepsia con "asepxia" (un jabón para el cuidado cutáneo ) aún con esto, casi todas las respuestas fueron correctas. 7/10
¿Que entiendes por esterilización?
- En esta pregunta fueron casi nulas las respuestas acertadas, puesto que se relaciono con la medicina, dando a entender que era la operación donde los hombres ya no pueden aportar esperma para la reproducción humana, teniendo un porcentaje de 5/10
Instrumental del laboratorio
Mechero Bunsen
En caso de utilizar mechero nunca se debe coger material por encima de la llama
Antes de comenzar a trabajar se procurará disponer de todo el material necesario para el procesamiento de la muestra
Tomar las medidas necesarias para evitar la contaminación de las muestras o/ y cultivo por microorganismos
Gradillas
Una gradilla es
una herramienta que forma parte del material de laboratorio (principalmente en
laboratorios de biología molecular, genética y química) y es utilizada para
sostener y almacenar gran cantidad de tubos de ensayo. 
Estufa de incubación
Es una cámara de temperatura controlada
para cultivo de microorganismos.
Frigorífico o cámaras refrigeradas
Se utilizan para conservar tanto
materiales (medios de cultivo, reactivos) como microorganismos.
Generalmente están a una temperatura fija
de 4ºC.
Congeladores
Microscopio óptico
Un microscopio
óptico es un microscopio basado
en lentes ópticos.
También se le conoce como microscopio de luz, (que utiliza luz o "fotones")
omicroscopio
de campo claro.
Centrífuga
Aparato que aplica sobre los tubos una
fuerza centrífuga lo que permite la separación de los distintos componentes de
la muestra mediante la precipitación en el fondo del tubo de las partículas en
suspensión.
Cabina de seguridad biológica
Es un
equipo diseñado para controlar los aerosoles y micro partículas asociados
al manejo del material biológico, potencialmente tóxicos o infecciosos, que se
generan en los laboratorios como resultado de actividades como la agitación y
centrifugación, el uso y manejo de pipetas, la apertura de recipientes con
presiones internas diferentes a la atmosférica, utilizando condiciones
apropiadas de ventilación.
Desionizador
de agua.
La
mayor parte de los trabajos que se realizan en un laboratorio de Microbiología
Clínica necesitan la utilización de agua pura con el fin de evitar cualquier
tipo de interferencia. Entre otra características debe: estar
exenta de materiales en suspensión o un
pH comprendido entre 5,0 y 7,5. Durante
años se ha utilizado agua destilada, en la actualidad los destiladores se han
ido abandonando para dar paso a desionizadores que
funcionan con resinas de intercambio iónico. También se pueden utilizar otras
técnicas como la ósmosis inversa.
Contador de colonias: Es un
aparato que mediante la iluminación de la placa y una lupa, nos permite
observar con mayor nitidez las colonias y por tanto facilita su recuento.
Balanzas
Instrumento
para pesar mediante la comparación del objeto que se quiere pesar con otro de
peso conocido; en su forma más sencilla consiste en dos platos que cuelgan de
una barra horizontal que está sujeta en su centro y permanece nivelada cuando
alcanza el equilibrio; el objeto que se desea pesar se coloca en uno de los
platos, y en el otro se van colocando pesas hasta nivelar horizontalmente la
barra.
Asas de siembra:
Se utilizan para sembrar. Pueden ser
metálicas o de plástico, curvas o rectas (para la siembra por picadura).
Ph-metros:
El
pH-metro es un sensor utilizado en el método electroquímico para medir el pH de
una disolución. La determinación de pH consiste en medir el potencial que se
desarrolla a través de una fina membrana de vidrio que separa dos soluciones
con diferente concentración de protones.
Placas de Petri
Son recipientes
para la preparación de medios de cultivo sólidos
Pipetas automáticas (micropipetas)
y puntas de pipeta:
Se utilizan para pipetear pequeñas
cantidades de líquidos.
Existen cuatro tamaños: de 0,5-2µm; de
2-20 µm; de 20-200 µm y de 200-1000 µm
Portas y cubres
Vasos de precipitados y matraces
Los
matraces se emplean principalmente en las valoraciones.
Autoclave
Es un procedimiento de esterilización
mediante calor húmedo. Se realiza en al autoclave durante 15 ó 20
min, según el volumen, a 115°C ó 121°C, según la naturaleza del material
que se desee esterilizar.
Horno de Pasteur: emplea
altas temperaturas (160-180º C)
durante un tiempo prolongado (1.5 a 3 horas).
Debido a su poca capacidad de penetración se usa para esterilizar vidrio y
metales. Actúa principalmente desnaturalizando las proteínas y secundariamente
oxidando los compuestos celulares.
Métodos de desinfección
Este proceso reduce en 3 a 5 log. la
contaminación microbiana inicial. Produce la destrucción de agentes infecciosos
o contaminantes presentes en objetos y ambientes. Asegura la eliminación de
formas vegetativas pero no de esporas bacterianas. Posee una seguridad de 1 en
1000.
DESINFECCION
CON SUSTANCIAS QUIMICAS
Los factores que se indican a continuación afectan la
eficacia de los desinfectantes:
INACTIVACION DEBIDA A LA SUCIEDAD. La presencia
de suciedad y otros materiales sedimentados reducen la eficacia de todos los
desinfectantes químicos. Cuando hay mucha suciedad, los desinfectantes no
surten ningún efecto. Por lo tanto, la desinfección con sustancias químicas
deberá efectuarse después de un proceso de limpieza o en combinación con el
mismo.
TEMPERATURA DE LA SOLUCION. En general,
cuanto más alta sea la temperatura más eficaz será la desinfección. Es
preferible usar, por lo tanto, una solución desinfectante tibia o caliente, que
una fría. Por lo que habrá que seguir las instrucciones del fabricante, ya que
por ejemplo a temperaturas superiores de 43o C, los yodóforos liberan yodo que
puede manchar los materiales, y la acción corrosiva del cloro aumenta cuando se
usan soluciones calientes de hipoclorito.
TIEMPO. Todos los
desinfectantes químicos necesitan un tiempo mínimo de contacto para que sean
eficaces. Este tipo de contacto mínimo puede variar de acuerdo con la actividad
del desinfectante.
CONCENTRACION. La concentración de
la solución de desinfectante necesaria, variará de acuerdo con las condiciones
de uso, además deberá ser adecuada para la finalidad a la que se destina y el
medio ambiente en que haya de emplearse. Las soluciones deberán prepararse, por
lo tanto, siguiendo estrictamente las instrucciones del fabricante.
ESTABILIDAD. Todas las soluciones
desinfectantes deberán ser de preparación reciente, en las que se hayan
utilizado utensilios limpios. El mantenimiento prolongado de soluciones
diluidas listas para ser usadas, puede reducir su eficacia, o convertiste, tal
vez, en un depósito de organismos resistentes. Los desinfectantes pueden
desactivarse si se mezclan con detergentes y otros desinfectantes no adecuados.
Es necesario verificar periódicamente la eficacia de los desinfectantes,
especialmente cuando se han disuelto para usarlos. Existen para tal fin equipos
de ensayo baratos y de fácil uso.
PRECAUCIONES. Los desinfectantes
químicos que pueden envenenar los alimentos, tales como los fenólicos, no deben
usarse en las fábricas de elaboración de alimentos, ni en vehículos para su
transporte. Deberá tenerse cuidado de que los desinfectantes químicos no dañen
al personal, y de que cuando se usan en lugares donde se guardan o transportan
animales, tales como establos y vehículos, no les produzcan daños y molestias.
CLASIFICACION DE DESINFECTANTES
AGENTES QUIMICOS
Entre los desinfectantes más comúnmente utilizados se
encuentran los que se indican a continuación:
CLORO Y PRODUCTOS A
BASE DE CLORO, INCLUIDOS LOS
COMPUESTOS DE
HIPOCLORURO
Estos compuestos si se utilizan debidamente, pueden
considerarse entre los mejores para los establecimientos. Pudiendo obtenerse
soluciones concentradas de hipoclorito de sodio líquido que contiene de 100,000
a 130,000 miligramos de cloro por litro (ppm), o mezclarse con detergentes en
forma de cristales clorados. Estos desinfectantes tienen un efecto rápido sobre
una gran variedad de microorganismos, y son relativamente baratos. Son los más
apropiados para la desinfección general de las plantas de productos
alimenticios. Deben usarse en concentraciones de 100 a 250 miligramos de cloro
disponible por litro. Como esté grupo de desinfectantes corroe los metales y
produce además efectos decolorantes, es necesario enjuagar lo antes posible las
superficies desinfectadas con dichos productos, después de un tiempo suficiente
de contacto. Los desinfectantes clorados, con excepción del bióxido de cloro,
pierden su eficacia ante la presencia de residuos orgánicos.
YODOFOROS
Estos compuestos siempre se mezclan con un detergente en
un medio ácido, por lo que son muy convenientes en los casos en que se necesite
un limpiador ácido. Su efecto es rápido y tienen una amplia gama de actividad
antimicrobiana. Para superficies limpias, normalmente se necesita, una solución
de unos 25 a 50 miligramos por litro de yodo disponible a pH 4. pierden su
eficacia con material orgánico. Es posible observar visualmente la eficacia de
los yodóforos, ya que pierden el color cuando el yodo residual ha bajado a
niveles ineficaces. Los yodóforos no son tóxicos cuando se emplean en concentraciones
normales, pero pueden incrementar el contenido total de yodo de la dieta.
Apenas tienen sabor u olor, pero mezclándose con determinadas sustancias en los
alimentos pueden causar envenenamiento. Los yodóforos pueden tener una acción
corrosiva en los metales, dependiendo de la fórmula del compuesto y la
naturaleza de la superficie a la que se apliquen. Por estas razones, debe
tenerse especial cuidado en eliminarlos enjuagando las superficies después de
utilizarlos.
COMPUESTOS
CUATERNARIOS DE AMONIO
Estos compuestos presentan también buenas características
detergentes. Son incoloros, relativamente no corrosivos de los metales y no son
tóxicos, pero pueden tener un sabor amargo. No son tan eficaces contra las
bacterias gram-negativas como el cloro y los desinfectantes a base de cloro y
yodo. Las soluciones tienden a adherirse a las superficies, por lo que es
necesario enjuagarlas a fondo. Debe utilizarse en concentraciones de entre
200-1200 miligramos por litro (mg/l). Se requieren concentraciones más altas
cuando se emplean con aguas duras. No son compatibles con jabones o detergentes
aniónicos.
AGENTES
ANFOTEROS TENSOACTIVOS
Este tipo de desinfectantes constan de un agente activo
con propiedades detergentes y bactericidas. Son de baja toxicidad, relativamente
no corrosivos, insípidos e inodoros, y son eficientes cuando se usan de acuerdo
con las recomendaciones del fabricante. Pierden su eficacia con material
orgánico.
ACIDOS Y ALCALIS
FUERTES
Además de sus propiedades detergentes, los ácidos y
álcalis fuertes tienen considerable actividad antimicrobiana. Debe tenerse
especial cuidado de que no contaminen los alimentos. Después de un tiempo de
contacto adecuado, todas las superficies que han sido desinfectadas deberán
someterse a un enjuague final con agua.
FENOL Y
COMPUESTOS RELACIONADOS
Utilizado para la desinfección de sanitarios y cuartos de
vestir, el difenil fenol se usa para impregnar las envolturas de frutas
cítricas y evitar el crecimiento de hongos. El pentaclorofenol se usa
extensamente en la preservación de la madera, como agente fungicida en
pinturas. La hidroxiquinolina cúprica se utiliza en pinturas como agente
fungicida, es soluble en agua y tiene alta toxicidad para el ser humano y es
muy económica.
AGENTES
GASEOSOS ESTERILIZANTES
El Oxido de etileno es muy efectivo contra los
microorganismos, pero es sumamente flamable y explosivo, y por lo tanto se
vende como CARBOXIDE, que es una combinación de 90% de óxido de etileno y 10%
de CO2, para reducir sus características explosivas y flamables. No debe
permitirse residuo alguno en los alimentos tratados con éste producto.
El ozono (03) se ha utilizado en el control de
microorganismos en los alimentos y la desinfección del agua. Es muy tóxico para
el ser humano, su efectividad se reduce a temperaturas y humedad relativamente
altas. Su uso se limita a la esterilización superficial ya que no tiene acción
permanente.
Y la beta propiolactona se utiliza en la descontaminación
de cuartos o edificios enteros.
AGENTES
FISICOS
CALOR
SECO. Requiere un largo período de tiempo y una alta temperatura.
HUMEDO. Los microorganismos son mucho menos resistentes a la destrucción por calor húmedo en la forma de vapor saturado a presión. Su aplicación tiene numerosas ventajas:
- Accesibilidad
- Bajo costo
- Ningún residuo tóxico
- Muy efectivo contra los microorganismos bajo condiciones
adecuadas de tiempo y temperatura.
RADIACION ULTRAVIOLETA
La mayor
acción bactericida se obtiene con longitudes de onda de 2500 a 2800 Amstrongs,
esté tipo de desinfección debe limitarse a las superficies y aire.
RADIACIONES IONIZANTES
Solamente las
radiaciones gamma de isótopos radiactivos o de reactores nucleares, y
radiaciones beta de aceleradores de electrones son capaces de suministrar la
penetración de la materia, en forma suficiente para producir una esterilización
efectiva.
ESTERILIZACION POR FILTRADO
Solamente puede hacerse a líquidos y grasas. La
eliminación bacteriológica depende del diámetro de los filtros usados, de la
densidad de las fibras en la base del filtro, y del nivel de contaminación
inicial.
VERIFICACION DE LA EFICACIA DE LOS
PROCEDIMIENTOS
Deberá verificarse la eficacia de los procedimientos de
limpieza y desinfección mediante la vigilancia microbiológica de las
superficies que entran en contacto con los productos.
En el muestreo para la verificación microbiológica del
equipo y las superficies que entran en contacto con los productos, deberá
utilizarse un agente atenuador (neutralizador) para eliminar cualquier residuo
de desinfectantes.
Crucigrama
- Horizontal
- 3. Pieza básica en el montaje de los sistemas
- 6. Se utiliza junto con el pistilo y sirve para moler/triturar sustancias solidas
- 8. Se utiliza para el calentamiento rápido de sustancias
- 9. Sirve para contener sustancias calcinadas o sólidos fundidos
- 10. Se utiliza para la esterilización con vapor de agua
- 12. Hace visibles al ojo humano objetos diminutos
- 15. Sirve para tomar muestras solidas de reactivos
- 19. Se utiliza para la calcinación de sustancias
- 20. Sirve para pesar los diversos reactivos sólidos
- Vertical
- 1. Es un dispositivo que genera calor y que lo mantiene dentro de un compartimiento cerrado para proceder a su cocción, calentamiento o destrucción
- 2. Se utiliza para realizar observaciones a través de... (4)
- 4. Se utiliza para que los tubos de ensaye tengan un soporte seguro y evitar derrames
- 5. Sirve para tomar la temperatura
- 7. Vaso de vidrio de forma tubular, con pie, generalmente graduado que se usa en los laboratorios para medir líquidos o gases
- 11. Se utiliza para conservar reactivos y microorganismos a temperaturas de -0°c
- 13. Utiliza la fuerza centrífuga para separar los distintos componentes de las sustancias
- 14. Sirve para medir volumen de líquidos con mayor precisión y exactitud
- 16. Sirve para sujetar instrumental en el montaje de sistemas
- 17. Sirve para medir volumen en pequeñas cantidades
- 18. Es un recipiente de vidrio generalmente con base circular y un cuello recto y estrecho, se utiliza para contener mezclas y líquidos
martes, 15 de septiembre de 2015
Sopa de letras
Esta
sopa de letras viene acompañada por un pequeño test, el cual contiene las
palabras que hay que encontrar en la misma, para hacerlo un poco más dinámico y
divertido para aquel que lo realice.
- ¿Cuál es el paso previo a cualquier proceso de desinfección y/o esterilización?
- ¿Qué proceso asegura la eliminación de formas vegetativas pero, no esporas bacterianas?
- ¿Cuál es el método para prevenir infecciones por destrucción de agentes patógenos?
- ¿Qué agente es el que controla y reduce la presencia de microorganismos que se encuentran sobre piel o mucosas?
- ¿Cómo se dice al material o instrumento que estuvo en contacto con sangre u otros líquidos orgánicos?
- ¿Con qué sustancia se realiza la limpieza en la des contaminación?
- ¿Qué soluciones actúan sobre el material orgánico?
- ¿Qué sustancias favorecen el contacto con la superficie embarnizado la suciedad?
- ¿Qué evita la precipitación del agua dura?
- ¿Qué sustancia produce un efecto de pulido en la superficie?
- ¿Cuál es el método de limpieza que utiliza productos y materiales como agua caliente, vapor, cepillos, etc…?
- ¿Qué método de limpieza utiliza sustancias que nos facilitan el desarrollo de la higienización?
- ¿Qué método de limpieza es la acción de limpiar con las manos?
- ¿Cuál es el método de limpieza que utiliza maquinaria, lava vajillas y túneles de lavado?
- ¿Cuál método de desinfección aplica calor húmedo para elevar la temperatura a 80°c?
- ¿En qué sustancia caliente se sumergen las piezas desmontables de las máquinas para su desinfección?
- ¿Qué tipo de detergente tiene un Ph menor a 7.2?
- ¿Qué tipo de detergente desagrega la suciedad de las superficies y la mantienen en suspensión?
- ¿Qué producto disuelve restos de grasa y aceite?
- ¿Qué productos impiden que los minerales se cristalicen, precipiten o se incrusten en los materiales?
Postulados de Koch
Postulados de Koch
Se
formularon a partir de los experimentos de Robert Koch con Bacillus anthracis.
Demostró que al inyectar una pequeña cantidad de sangre de ratón enfermo en uno
sano obtenía los síntomas de la enfermedad, después de repetir la operación
alrededor de unas 20 veces consiguió cultivar la bacteria en caldos nutritivos
fuera del animal y demostró que incluso después de muchas transferencias la
bacteria podía causar la enfermedad cuando se le inyectaba a un animal sano.
Los
postulados son los siguientes:
• El agente patógeno debe estar presente
en los animales enfermos y ausentes en los sanos.
• El agente debe estar cultivado en un
cultivo axénico puro (De una sola especie microbiana) aislado del cuerpo del
animal.
• El agente aislado en un cultivo
axénico debe provocar la enfermedad en un animal susceptible al ser al que se
le introdujo el patógeno.
• El agente debe ser aislado de nuevo de
las lesiones producidas en los animales de experimentación y ser idéntico al
inoculado originalmente.
Medios
de cultivo:
Tienen
un gel o una solución que tiene los nutrientes necesarios para permitir el
crecimiento de virus, microorganismos, células, tejidos vegetales o incluso
pequeñas plantas. Según lo que se quiera hacer crecer.
Clasificación:
Según sus cualidades Físicas:
Líquidos
Semisólidos
Sólidos
Según su origen:
Naturales: son los preparados a
partir de sustancias naturales de origen animal o vegetal como ser extractos de
tejidos o infusiones y cuya composición química no se conoce exactamente.
Sintéticos: son los medios que
contienen una composición química definida cualitativamente y
cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados reproducibles.
semisintéticos: son los sintéticos a
los que se les añaden factores de crecimiento bajo una forma de un extracto
orgánico complejo, como por ejemplo extracto de levadura.
Según su formulación:
Químicamente definidos: se conoce la
cantidad exacta de cada uno de los compuestos que hay en el medio.
Complejos: se realizan a partir de
extractos naturales (extracto de levadura, sangre, etc.); no se conoce
exactamente cuál es la composición del medio; sin embargo, presenta la ventaja
de que ya están presentes todos o casi todos los elementos que una célula puede
requerir.
Según su uso:
Medio general: medio en donde crecen
todo tipo de microorganismos, excepto los que necesitan condiciones especiales
(por ejemplo, agar).
Medio selectivo: permite seleccionar
el crecimiento de una especie o grupo determinado (hongos, bacterias entéricas,
protozoos...).
Medio diferencial: permite
identificar una especie con otra, ambas en el mismo medio. Puede ser por su
crecimiento, su metabolismo, su respiración, etc. (por ejemplo, medio de
McConkey).
Medio de enriquecimiento: contiene
los nutrientes necesarios para apoyar el crecimiento de una amplia variedad de
microorganismos, se utiliza para la cosecha de diferentes tipos de
microorganismos en un mismo medio.
Medio mínimo: contiene la mínima
cantidad de nutrientes posible que permite el crecimiento de una especie;
Medio de transporte: preparado para
servir como almacenamiento temporal a especímenes transportados o en
transferencia; mantienen su viabilidad y su concentración;simple
Los medios de cultivo en microbiología
Los
medios de cultivo en microbiología
Uno de los sistemas más importantes para la identificación de
microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias
artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que
crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los
microorganismos es el Cultivo. Se han preparado más de 10.000 medios de cultivo
diferentes.
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo
artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de
humedad y presión de oxígeno adecuadas, así como un grado correcto de acidez o
alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de
crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo
contaminante.La mayoría de las bacterias patógenas requieren nutrientes complejos
similares en composición a los líquidos orgánicos del cuerpo humano. Por eso,
la base de muchos medios de cultivo es una infusión de extractos de carne y
Peptona a la que se añadirán otros ingredientes.
El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de
medios de cultivo. Se licúa completamente a la temperatura del agua hirviendo y
se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mínimas excepciones no tiene efecto
sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen
en él.La Gelatina es otro agente solidificante pero se emplea mucho menos ya
que bastantes bacterias provocan su licuación.
En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales
de enriquecimiento como hidratos de carbono, suero, sangre completa, bilis,
etc. Los hidratos de Carbono se adicionan por dos motivos fundamentales: para
incrementar el valor nutritivo del medio y para detectar reacciones de
fermentación de los microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la
sangre completa se añaden para promover el crecimiento de los microorganismos
menos resistentes.
También se añaden colorantes que actúan como indicadores para detectar,
por ejemplo, la formación de ácido o como inhibidores del crecimiento de unas
bacterias y no de otras (el Rojo Fenol se usa como indicador ya que es rojo en
pH básico y amarillo en pH ácido. La Violeta de Genciana se usa como inhibidor
ya que impide el crecimiento de la mayoria de las bacterias Gram-positivas).
Condiciones generales para el cultivo de microorganismos:
El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se
ve afectado por una serie de factores de gran importancia y que, en algunos
casos, son ajenos por completo al propio medio.
1- disponibilidad de nutrientes adecuados
Un medio de cultivo adecuado para la investigación microbiológica ha de
contener, como mínimo, carbono, nitrógeno, azufre, fósforo y sales inorgánicas.
En muchos casos serán necesarias ciertas vitaminas y otras sustancia inductoras
del crecimiento. Siempre han de estar presentes las sustancias adecuadas para
ejercer de donantes o captadores de electrones para las reacciones químicas que
tengan lugar.
Todas estas sustancias se suministraban originalmente en forma de
infusiones de carne, extractos de carne o extractos de levadura. Sin embargo,
la preparación de estas sustancias para su aplicación a los medios de cultivo
provocaban la pérdida de los factores nutritivos lábiles.
Actualmente, la forma más extendida de aportar estas sustancias a los
medios es utilizar peptona que, además, representa una fuente fácilmente
asequible de nitrógeno y carbón ya que la mayoría de los microorganismos, que
no suelen utilizar directamente las proteínas naturales, tienen capacidad de
atacar los aminoácidos y otros compuestos más simples de nitrógeno presentes en
la peptona.
2- consistencia adecuada del medio
Partiendo de un medio líquido podemos modificar su consistencia
añadiendo productos como albúmina, gelatina o agar, con lo que obtendríamos
medios en estado semisólido o sólido.
Los medios solidificados con gelatina tienen el gran inconveniente de
que muchos microorganismos no se desarrollan adecuadamente a temperaturas
inferiores al punto de fusión de este solidificante y de que otros tienen la
capacidad de licuarla.
Actualmente los medios sólidos son de uso universal, por su versatilidad
y comodidad, pero hay también gran cantidad de medios líquidos cuyo uso está
ampliamente extendido en el laboratorio.
3- presencia (o ausencia) de oxígeno y otros gases
Gran cantidad de bacterias pueden crecer en una atmósfera con tensión de
oxígeno normal. Algunas pueden obtener el oxígeno directamente de variados
sustratos. Pero los microorganismos anaerobios estrictos sólo se desarrollarán
adecuadamente en una atmósfera sin oxígeno ambiental. En un punto intermedio,
los microorganismos microaerófilos crecen mejor en condiciones atmosféricas
parcialmente anaerobias (tensión de oxígeno muy reducida), mientras los
anaerobios facultativos tienen un metabolismo capaz de adaptarse a cualquiera de
las citadas condiciones.
4- condiciones adecuadas de humedad
Un nivel mínimo de humedad, tanto en el medio como en la atmósfera, es
imprescindible para un buen desarrollo de las células vegetativas microbianas
en los cultivos. Hay que prever el mantenimiento de estas condiciones mínimas
en las estufas de cultivo a 35-37ºC proporcionando una fuente adecuada de agua
que mantenga la humedad necesaria para el crecimiento de los cultivos y evitar
así que se deseque el medio.
5- Luz ambiental
La mayoría de los microorganismos crecen mucho mejor en la oscuridad que
en presencia de luz solar. Hay excepciones evidentes como sería el caso de los
microorganismos fotosintéticos.
6- pH
La concentración de iones hidrógeno es muy importante para el
crecimiento de los microorganismos. La mayoría de ellos se desarrollan mejor en
medios con un pH neutro, aunque los hay que requieren medios más o menos
ácidos. No se debe olvidar que la presencia de ácidos o bases en cantidades que
no impiden el crecimiento bacteriano pueden sin embargo inhibirlo o incluso
alterar sus procesos metabólicos normales.
7- Temperatura
Los microorganismos mesófilos crecen de forma óptima a temperaturas
entre 15 y 43ºC. Otros como los psicrófilos crecen a 0ºC y los temófilos a 80ºC
o incluso a temperaturas superiores (hipertemófilos). En líneas generales, los
patógenos humanos crecen en rangos de temperatura mucho más cortos, alrededor
de 37ºC, y los saprofítos tienen rangos más amplios.
8- Esterilidad del medio
Todos los medios de cultivo han de estar perfectamente estériles para
evitar la aparición de formas de vida que puedan alterar, enmascarar o incluso
impedir el crecimiento microbiano normal del o de los especimenes inoculados en
dichos medios. El sistema clásico para esterilizar los medios de cultivo es el
autoclave (que utiliza vapor de agua a presión como agente esterilizante)
TEORÍA CELULAR
TEORÍA CELULAR
La teoría celular constituye uno de los principios
básicos de la biología, cuyo crédito le pertenece a los grandes científicos
alemanes Theodor Schwann,
Matthias
Schleiden y Rudolph Virchow, aunque por supuesto, no
hubiese sido posible sin las previas investigaciones del gran Robert Hooke.
En el siglo XVII,
más precisamente en el año 1665, el científico inglés Robert Hooke fue
quien descubrió y describió la existencia de lo que damos en llamar células. El
señor Hooke dio cuenta de esta estructura básica de la vida mientras examinaba
pequeñas y delgadas rodajas de corcho y material vegetal en su microscopio, ya
que él fue uno de los primeros en diseñar uno de estos artefactos. Sin darse
cuenta, Hooke descubrió la unidad estructural básica y esencial de todos los
organismos, la base de toda materia viva.
Se necesitaron cientos de años e investigaciones de
numerosos hombres de ciencia hasta poder alcanzar una conclusión concisa, pero
luego de dos siglos enteros, gracias al desarrollo tecnológico y a los diversos
avances en los estudios de la materia, los primeros postulados de la teoría
celular fueron surgiendo. Tras una cuantiosa investigación desarrollada por los
científicos alemanes Matthias Jakob Schleiden y Theodor Schwann se logró crear
una lista de principios o postulados que describen el mundo celular.
En el año 1838 Schleiden indicó que todo el material
vegetal se compone por células. Poco tiempo después y más precisamente al año
siguiente, su colega y compatriota, el fisiólogo Theodor Schwann llegó a la
misma conclusión sobre los animales. Los resultados de estas conclusiones son
lo que se conoce como la teoría celular. A continuación, veamos los 4
postulados esenciales.
Los 4 postulados de la teoría celular
1. Absolutamente
todos los seres vivos están compuestos por células o por segregaciones de las
mismas. Los organismos pueden ser de una sola célula (unicelulares) o de varias
(pluricelulares). La célula es la unidad estructural de la materia viva y una
célula puede ser suficiente para constituir un organismo.
2. Todos
los seres vivos se originan a través de las células. Las células no surgen de
manera espontánea, sino que proceden de otras anteriores.
3. Absolutamente
todas las funciones vitales giran en torno a las células o su contacto
inmediato. La célula es la unidad fisiológica de la vida. Cada célula es un
sistema abierto, que intercambia materia y energía con su medio.
4. Las
células contienen el material hereditario y también son una unidad genética.
Esto permite la transmisión hereditaria de generación a generación.
Interpretación moderna sobre los postulados de la teoría
celular.
Con el paso del tiempo, la teoría celular no fue dejada
de lado ni mucho menos. Diversos científicos han continuado con el desarrollo
de la misma, las investigaciones y el estudio de sus postulados, realizando
nuevas interpretaciones, añadiendo algunos conceptos y corroborando algunos
datos.
Algunos nombres como los de Rudolf Virchow y Louis
Pasteur figuran entre las investigaciones, además, el desarrollo de las
ciencias modernas junto con los avances que el microscopio electrónico le ha
proporcionado a la comunidad científica, han permitido una interpretación
moderna, la llamada: teoría celular moderna. En ella se postulan algunos
componentes básicos de la antigua junto con estos detalles:
Los organismos pueden ser unicelulares, compuestos por
una célula, o multicelular, compuestas de muchas células.
Cuando las células se
dividen, la información hereditaria que contienen (ADN) se transmite de célula
a célula.
El flujo de energía se
produce dentro de las células.
Todas las células tienen
básicamente la misma composición.
La actividad del organismo
está determinada por la actividad de las células independientes.
La teoría tiene dos
componentes: todos los seres vivos están formados por células y todas las
células derivan de otras células. Esto da la base para una definición para
todos los seres vivos. Todos los seres vivos están formados por células y todos
son capaces de reproducirse.
Célula,
es una palabra muy sencilla pero con un gran significado en la historia de la
biología. En 1665, el científico inglés Robert Hooke, utilizando un microscopio
primitivo, observó en un pedazo de corcho muy delgado pequeñas celdas a las
cuales llamó células, hasta este momento dichas celdas no se relacionaban con
la vida de las plantas, sino con el almacenamiento de ciertos
"jugos". Desde aquí el microscopio comenzó a ser una herramienta
esencial en el ámbito científico de la época y en el desarrollo de la biología
en general.Luego, muchos otros científicos en otros países durante diecisiete
décadas y utilizando el microscopio, lograron perfeccionar el diseño de este
instrumento lo que permitió una mejor visualización de las células.
reseña
histórica de la teoría celular:
ROBERT
HOOKE(1665)
Con
sus observaciones postuló el nombre célula para referirse a los compartimentos
que encontró en un pedazo de corcho, al observar al microscopio
ANTON
VAN LEEUWENHOEK (1673)
Realizó
observaciones de microorganismos de charcas, eritrocitos humanos,
espermatozoides.
THEODOR
SCHWANN (1839)
Postuló
el primer concepto sobre la teoría celular . Las células son las parte
elementales tanto de plantas como de animales.
RUDOLF
VIRCHOW (1850)
Escribió:
"Cada animal es la suma de sus unidades vitales, cada una de las cuales
contiene todas las características de la vida. Todas las células provienen de
otras células".
Los
postulados que definen como tal la teoría celular son:
Todos
y cada uno de los organismos vivos están constituidos por una (unicelulares) o
más células (multicelulares).
Los
antecesores de las células, son células preexistentes.
PROPIEDADES
DE UN SISTEMA VIVO
1.Nivel
de organización: La naturaleza en su afán de reducir los errores que se puedan
generar en un sistema vivo, le confiere a las células la propiedad de
organizarse a distintos niveles entre los cuales podemos contemplar: la
organización de átomos(La célula no es una colección de elementos químicos de
la tierra dispuestos aleatoriamente, en realidad es un sistema químico
selectivo conformado esencialmente por C, H, O, N, S, P, que son los
principales elementos de la vida. Lo anterior revela que el evento celular y su
organización no es producto del azar. Por otra parte, la célula se considera en
realidad un sistema termodinámico abierto, que toma energía de su entorno para
mantener la estructura) en moléculas de tamaño pequeño, éstas a su vez en
polímeros gigantes y luego en complejos poliméricos que subsecuentemente
conformarán los organelos subcelulares y finalmente la célula como unidad
básica estructural y funcional.
2.Nutrición:
Las células toman sustancias del medio que utilizan en la obtención y
transformación de la energía necesaria para su metabolismo.
3.Crecimiento:
También son capaces de utilizar las sustancias que asimilan del medio para
sintetizar biomoléculas que contribuyen al aumento de su tamaño y
autorreplicación . El crecimiento es por tanto, un aumento en la masa celular
como resultado en el incremento del tamaño y/o número de las células
individuales. Este crecimiento puede ser uniforme en las diversas partes del
cuerpo de un organismo, o diferencial en unas partes, de modo que las
proporciones corporales cambian de acuerdo con el crecimiento.
4.Diferenciación:
Esta propiedad hace parte del ciclo celular, originando o modificando ciertas
estructuras y/o sustancias que conducen a cambios en su morfología y función.
5.Señalización
Química: Es una característica que se presenta con mayor frecuencia en los
organismos pluricelulares cuyas células requieren de señales químicas que
facilitan la comunicación intercelular, la cual permitirá que posteriormente se
puedan diferenciar y cumplir con una función determinada.
6.Respuesta
a estímulos (Irritabilidad) ocasionados por cambios físicos o químicos en el
ambiente interno o externo. La mayoría de las células poseen mecanismos
conformados de receptores los cuales le permiten desarrollar cierta
sensibilidad a sustancias químicas (como se explicó anteriormente) tales como
hormonas, factores de crecimiento, materiales extracelulares, así como también
responder de manera específica a compuestos presentes en las superficies de
otras células. Las respuestas más comunes a los diferentes estímulos pueden
conducir a la alteración de las actividades metabólicas, preparación para la
división celular, desplazamiento de un lugar a otro y aún al suicidio
(apoptosis).
7.Evolución:
Las células son susceptibles de cambios para adquirir nuevas propiedades
biológicas que les permitan adaptarse a medios particulares o a su misma
supervivencia. Por consiguiente se pueden elaborar árboles filogenéticos que
muestran las relaciones existentes entre ellas.
8.Capacidad
de autoregulación: Siendo la célula un sistema tan complejo, necesita de
ciertos mecanismos de control para corregir errores que se pueden presentar. La
autorregulación se hace evidente cuando falla alguno de los puntos de control
como en el caso del cáncer. El problema de dichas fallas se debe a que cada uno
de los pasos necesarios en determinado proceso celular es esencial (algo así
como las argollas en una cadena) ya que es necesario que suceda un paso para
que se dé el siguiente, por tanto un error en alguna de las argollas de la
cadena debe ser corregido a tiempo para que la célula continúe con su ciclo
normal.
ORGANIZACIÓN
ESTRUCTURAL DE LAS CÉLULAS
Con
el desarrollo de la microscopía, en 1937 Chatton propuso dos términos para
designar las clases de células presentes en la naturaleza: células
procarióticas y células eucarióticas. Estos términos tienen significado
etimológico (pro = antes, karyon = núcleo, eu = verdadero), debido a la
estructura que presentaban las células al observarse con detenimiento al
microscopio.
Estructura celular procariota
Los dos tipos de células
muestran algunas características similares, tales como:
Poseen un lenguaje
genético idéntico.
Ambas tienen rutas
metabólicas comunes.
Presentan estructuras
similares en algunos de sus componentes. Ej: la membrana celular, la cual
funciona como una barrera de permeabilidad selectiva.
Ambos tipos de células
pueden estar rodeados por pared celular que proporciona rigidez a las células
sin embargo, su composición es diferente.
Los dos tipos celulares
tienen una región nuclear donde está el material genético rodeado por el
citoplasma. En las procarióticas se caracteriza como un nucleoide sin
envoltura, mientras que en las eucarióticas dicha región siempre se encuentra
separada de citoplasma por la envoltura nuclear.
Pero también presentan
muchas características que las diferencian y por las cuales se genera la
división, entre ellas:
CARACTERÍSTICA
PROCARIOTICAS
EUCARIÓTICAS
TAMAÑO CELULAR
1 a 10 mm de diámetro
10 a 100 mm de diámetro
MATERIAL GENÉTICO
Adherido a la membrana
plasmática y concentrado en una región denominada Nucleoide
Presente en un núcleo
rodeado por una envoltura
CROMOSOMAS
Único, generalmente
circular y sin proteínas
Muchos, lineales y con
proteínas (histonas y no histonas)
ADN
0.25mm -3mm de
longitudpares de bases
En células tan
"simples" como la levadura 4,6 mm. de longitud
CITOPLASMA
En gran medida
indiferenciado.
Contiene una gran
cantidad de estructuras, llamadas organelos subcelulares algunos de ellos con
unidad de membrana.
ORGANELOS SUBCELULARES
RibosomasCarente de
sistema de citomembranas.
Ribosomas, Sistema de
citomembranas (mitocondrias, cloroplastos, retículo endoplasmático, aparato de
golgi, vacuolas, lisosomas, citoesqueleto)
PARED CELULAR
Constituído por
peptidoglicanos. Excepto en arquea y micoplasmas.
Compuesta principalmete
por celulosa, en algunos casos presenta lignina, pectina. Excepto células
animales.
MOVILIDAD
Flagelos constituidos por
flagelina
Cilios y flagelos
constituidos por tubulina con organización 9+2.
EUCARIOTAS Y PROCARIOTAS
Por su estructura se
distinguen dos tipos de células: procarióticas y eucarióticas:
-PROCARIÓTICAS. Muy
simples y primitivas. Apenas tienen estructuras en su interior. Se caracterizan
por no tener un núcleo propiamente dicho; esto es, no tienen el material
genético envuelto en una membrana y separado del resto del citoplasma. Además,
su ADN no está asociado a ciertas proteínas como las histonas y está formando
un único cromosoma. Son procariotas, entre otras: las bacterias y las
cianofíceas.
-EUCARIÓTICAS: Células
características del resto de los organismos unicelulares y pluricelulares,
animales y vegetales. Su estructura es más evolucionada y compleja que la de
los procariotas. Tienen orgánulos celulares y un núcleo verdadero separado del citoplasma
por una envoltura nuclear. Su ADN está asociado a proteínas (histonas y otras)
y estructurado en numerosos cromosomas.
ESTRUCTURA GENERAL DE LA
CÉLULA EUCARIÓTICA
En toda célula
eucariótica vamos a poder distinguir la siguiente estructura:
- Membrana plasmática
- Citoplasma
- Núcleo
El aspecto de la célula
es diferente según se observe al microscopio óptico (MO) o al electrónico
(MET). Al MO observaremos la estructura celular y al MET la ultraestructura.
DIFERENCIAS ENTRE LAS
CÉLULAS VEGETALES Y ANIMALES
Por lo general las
células vegetales son de mayor tamaño que las animales, tienen plastos y están
envueltas en una gruesa pared celular, también llamada pared celulósica o
membrana de secreción. Sus vacuolas son de gran tamaño y no tienen centriolos.
ORGÁNULOS DE LA CÉLULA
CÉLULA ANIMAL
1 Membrana plasmática
2 Retículo endoplasmático
granular
3 Retículo endoplasmático
liso
4 Aparato de Golgi
5 Mitocondria
6 Núcleo
7 Ribosomas
8 Centrosoma (Centriolos)
9 Lisosomas
10 Microtúbulos
(citoesqueleto)
CÉLULA VEGETAL
1 Membrana plasmática
2 Retículo endoplasmático
granular
3 Retículo endoplasmático
liso
4 Aparato de Golgi
5 Mitocondria
6 Núcleo
7 Ribosomas
8 Cloroplasto
9 Pared celulósica
10 Vacuola
BREVE DESCRIPCIÓN DE LA
ESTRUCTURA Y FUNCIÓN DE LOS ORGÁNULOS CELULARES
MEMBRANA
Membrana plasmática:
Delgada lámina que recubre la célula. Está formada por lípidos, proteínas y
oligosacáridos. Regula los intercambios entre la célula y el exterior.
Pared celular: Gruesa
capa que recubre las células vegetales. Está formada por celulosa y otras
sustancias. Su función es la de proteger la célula vegetal de las alteraciones
de la presión osmótica.
CITOPLASMA
Hialoplasma: Es el
citoplasma desprovisto de los orgánulos. Se trata de un medio de reacción en el
que se realizan importantes reacciones celulares, por ejemplo: la síntesis de
proteínas y la glicolisis. Contiene los microtúbulos y microfilamentos que
forman el esqueleto celular.
Retículo endoplasmático:
Red de membranas intracitoplasmática que separan compartimen-tos en el
citoplasma. Ahí dos clases: granular y liso. Sus funciones son: síntesis de
oligosacáridos y maduración y transporte de glicoproteínas y proteínas de
membrana.
Ribosomas: Pequeños
gránulos presentes en el citoplasma, también adheridos al retículo
endoplasmático granular. Intervienen en los procesos de síntesis de proteínas
en el hialoplasma.
Aparato de Golgi: Sistema
de membranas similar, en cierto modo, al retículo pero sin ribosomas. Sirve
para sintetizar, transportar y empaquetar determinadas sustancias elaboradas
por la célula y destinadas a ser almacenadas o a la exportación.
Lisosomas: Vesículas que
contienen enzimas digestivas. Intervienen en los procesos de degradación de
sustancias.
Vacuolas: Estructuras en
forma de grandes vesículas. Almacenamiento de sustancias.
Mitocondrias: En ellas se
extrae la energía química contenida en las sustancias orgánicas (ciclo de Krebs
y cadena respiratoria).
Centrosoma: Interviene en
los procesos de división celular y en el movimiento celular por cilios y
flagelos.
Plastos: Orgánulos
característicos de las células vegetales. En los cloroplastos se realiza la
fotosíntesis.
NÚCLEO
Contiene la información
celular.
Nucleoplasma: En él se
realizan las funciones de replicación y transcripción de la información
celular. Esto es, la síntesis de ADN y ARN.
Nucléolo: Síntesis del
ARN de los ribosomas.
Envoltura nuclear: Por
sus poros se realizan los intercambios de sustancias entre el núcleo y el
hialoplasma.
La teoría
celular dice que: "todos los organismos vivos están compuestos de una o
más células" y que éstas son las unidades más pequeñas que pueden llamarse
vivas.
En 1590 los
hermanos Hans y Zacarías Hanssen (holandeses), conectaron dos lentes mediante
un tubo, creando el primer microscopio.
En 1665 el
inglés Robert Hooke observó con un primitivo microscopio, láminas muy finas de
corcho.
Presentó las láminas
dibujadas a la Real Sociedad de Londres, describió lo observado con las
siguientes palabras: “el corcho está formado por celdas no muy profundas, que
consisten en pequeñas cajas” Utilizó el término celda porque los compartimentos
que vio en el corcho le recordaron pequeños cuartos, estos compartimentos en el
corcho estaban vacíos.
En 1675, Antonie van
Leeuwenhoek (holandés) descubrió "animales microscópicos" en el agua
estancada.
Postulados de la teoría
celular
Los postulados de la
teoría celular de nuestra época incluyen las ideas expuestas por los
mencionados investigadores:
1. Todos los seres vivos
están compuestos de células y productos celulares.
2. Sólo se forman células
nuevas a partir de células preexistentes.
3. Todas las células
actuales son descendientes de células ancestrales.
Concepto actual de célula
La célula es la unidad
más pequeña de materia viva, capaz de llevar a cabo todas las actividades
necesarias para el mantenimiento de la vida. Tiene todos los componentes
físicos y químicos necesarios para su propio mantenimiento, crecimiento y
reproducción.
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